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    葡聚糖凝胶分离的技巧和使用心得

    更新时间:2021-06-22浏览:1088次

      葡聚糖凝胶指的是由一定平均相对分子质量的葡聚糖(dextran)和甘油基以醚桥形式相互交联而成,具有立体网状结构,应用面广的一类凝胶,国外商品名为Sephadex。交联度的大小,可通过控制交联剂(一般为环氧氯丙烷)和葡聚糖的配比以及反应条件来控制。
      葡聚糖凝胶分离的技巧和使用心得:
     ?。?)流速不可太快,切切不可新急,所谓欲速则不达。
     ?。?)柱子尽可能长,SephadexLH20柱长的增加将极大地改善分离,所不要吝惜填料,宁可将填料全装在一根大柱子中,不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力,打击敌人。
     ?。?)馏分一定要接的细,可1/10,或1/20个保留体积接成一馏分。
     ?。?)洗脱体积一般为2-3个保留体积,对特殊保留强的化合物,可洗脱5个保留体积。
     ?。?)鞣质成分死吸附严重,如不在乎填料者,可用SephadexLH20分鞣质。
     ?。?)SephadexLH20对黄酮类成分的分离效果,方法很成型,有大量文献参考。
     ?。?)填料反复使用,每次用完,一般可用甲醇将柱子洗干净,然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来,待用。
      SephadexLH-20是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成,属于分子筛凝胶,尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。例如:类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等,PharmadexLH-20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工业规模的制备,既可用于初步纯化步骤,也可用于终精制步骤,如非对映同分异构体的分离。

     

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